Luc報告基因底物/ D-Luciferin熒光素鉀鹽/超純級別

• 活體成像研究/體外生物發(fā)光研究/轉錄水平研究

搜索關鍵詞：Luc reporter gene 報告基因；In vivo imaging 活體成像研究；轉錄水平研究；熒光素酶/ATP水平研究；報告基因質粒；報告基因bing毒顆粒；螢火蟲熒光素；甲蟲熒光素；CAS：115144-35-9；

基本描述：

D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整個生物技術領域，特別是體內活體成像技術。作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下，D-熒光素（底物）被氧化發(fā)光。當熒光素過量時，產生的光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關性（見下圖）。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質粒轉染進入細胞后，導入研究動物如大小鼠體內，之后注入熒光素，通過生物發(fā)光成像技術（BLI）來檢測光強度變化，從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響，根據生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。

基本應用：

D-熒光素也常用于體外研究，包括熒光素酶和ATP水平分析；報告基因分析；高通量測序和各種污染檢測。

常見商業(yè)化類型的差異（熒光素鉀，鈉，游離酸）：

目前市場上有三種產品形式，D-熒光素（游離酸），D-熒光素（鈉鹽），和D-熒光素（鉀鹽）。這三種產品主要差別在于溶解特性。

1）D-熒光素（游離酸）在水以及緩沖體系內的溶解性都很弱，除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。

2）D-熒光素（鈉鹽）和D-熒光素（鉀鹽）能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中，使用方便，溶劑無毒性，特別適合體內實驗。配成溶液后的三種產品，在絕大多數應用上都沒有實質性的差別。

3）D-熒光素（鈉鹽）和D-熒光素（鉀鹽）基本上沒有差別，主要是使用習慣等因素影響。整體來看，鉀鹽的應用文獻明顯多于鈉鹽。

D-熒光素鉀鹽基本特性：

1）   CAS NO：115144-35-9

2）   化學名：4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt, D-Luciferin firefly, potassium salt

3）   分子式：C₁₁H₇N₂O₃S₂ K

4）   分子量：318.42 g/mol

5）   純度：＞99% (HPLC)，分子生物學級（超純）

6）   外觀：淺黃色至黃色粉末

7）   溶解性：溶于水（60 mg/ml）

使用方法【詳細方法見guan網】：

A．體外生物發(fā)光檢測

儲存液制備

用蒸餾水溶解D-熒光素（鉀鹽），配制成15mg/ml的儲存液（100×），混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存，避免反復凍融。建議使用的工作液濃度為150µg/ml（相當于468µM）。

B．活體成像分析

用無菌的PBS（w/o Mg²⁺）或者DPBS（w/o Mg²⁺）配制D-熒光素（鉀鹽）工作液（15mg/ml），0.2µm濾

膜過濾除菌。混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存，避免反復凍融。一旦使用，放到4℃解凍，保持

冰冷且避光。

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注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
 

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D-Luciferin熒光素鉀鹽 熒光探針與細胞染色   D-Luciferin熒光素鉀鹽 熒光探針與細胞染色