Y1HGold酵母化學感受態細胞

簡要描述：

Y1HGold酵母化學感受態細胞是Clontech GAL4-AbA酵母單雜交系統用的菌株，MATα型，能直接轉化質粒進行文庫篩選。Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統需要兩種質粒配套使用，分別為pAbAi和pGADT7。

產品時間：2024-03-20

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MF2362Y1HGold酵母化學感受態細胞的詳細資料：

Y1HGold Chemically Competent Cell

酵母菌化學感受態細胞

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見我司（懋康生物）整理的酵母雙雜交（Yeast two-hybrid assay）產品專題。

產品關鍵詞：

GAL4-AbA酵母單雜交系統；Y1HGold；pAbAi；pGADT7；Ar Qual；X-α-Gal ；Aureobasidin A （AbA）；金擔子素；

產品訂購：

貨號	產品名稱	規格	價格（元）
MF2362-1000UL	Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化學感受態細胞	10×100μl	290
MF2362-5000UL	Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化學感受態細胞	50×100μl	1320

產品組分：

組分編號	組分名稱	保存	貨號（規格）
組分編號	組分名稱	保存	MF2362-1000UL	MF2362-5000UL
MF2362-A	Y1HGold Competent Cell	-80℃	10×100μl	50×100μl
MF2362-B	pGADT7 Control Vector (10ng/μl)	-80℃	10μl	10μl
MF2362-C	Carrier DNA (5μg/μl)	-20℃	100μl	500μl
MF2362-D	PEG/LiAC Solution	+4℃	5ml	25ml

產品描述

酵母單雜交是在酵母雙雜交的基礎上發展起來，不同于雙雜交用來研究蛋白-蛋白間的相互作用，單雜交主要用于研究蛋白和DNA的相互作用。

Y1HGold是Clontech GAL4-AbA酵母單雜交系統用的菌株，MATα型，能直接轉化質粒進行文庫篩選。

Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統需要兩種質粒配套使用，分別為pAbAi和pGADT7。前者篩選標志為Ura，用于表達pBait-AbAi構建子（通過將bait-DNA 單拷貝或串聯重復序列克隆到pAbAi載體所得）；后者篩選標志為Leu，用于表達GAL4 AD與誘捕蛋白（prey）的融合蛋白。Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統的工作原理在于：基因組整合有pBait-AbAi的酵母報告菌株，當誘捕蛋白（prey）結合到誘餌序列（bait-DNA），GAL4 AD會激活AUR1-C報告基因的表達，這一表達使得細胞能夠在含篩選抗生素金擔子素（Aureobasidin A，AbA）的培養基上生長。與傳統的營養缺陷報告基因相比，AUR1-C（AbA^r）在很低濃度（100-200 ng/ml）下即可以有效殺死非抗性克隆，大大降低背景克隆生長。這一優勢也可降低酵母單雜交假陽性發生的概率。

本品為經特殊工藝制備的Y1HGold酵母菌化學感受態細胞，用pGADT7質粒檢測轉化效率＞10⁴cfu/μg DNA。且在-80℃能穩定保存三個月。

基因型

MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met-, MEL1

使用方法

取100 µl冰上融化的Y1HGold化學感受態細胞，依次加入預冷的目的質粒2-5 µg，Carrier DNA （95-100℃ 孵育5 min，快速冰浴。重復一次。）10 µl，PEG/LiAc 500µl，用槍吹打幾次充分混勻，30℃水浴30 min（在15min時翻轉6-8次混勻）。
之后將管子放42℃水浴15 min（在7.5min時翻轉6-8次混勻）。
5000 rpm離心40s棄上清，用400 µl ddH₂O重懸沉淀，離心30s棄上清。
用50 µl ddH₂O重懸，涂板，放入恒溫培養箱29℃培養48-96 h。

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貨號	名稱	規格
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MF2360-1000UL	NMY51 Chemically Competent Cell 酵母菌化學感受態細胞	10×100μl
MS6303-350G	YPDA Agar Medium YPDA瓊脂培養基	350g
MS6304-250G	YPDA Medium YPDA液體培養基	250g
MS6311-467G	Minimal SD Agar Base SD瓊脂基礎培養基	467g
MS6312-267G	Minimal SD Base SD基礎培養基	267g
MS6317-10G	DO Supplement -Leu	10g
MS6320-10G	DO Supplement -His/-Leu	10g
MS6334-10G	DO Supplement -Leu/-Met/-Trp	10g
MS6342-10G	DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp	10g
MS0002-1ML	Aureobasidin A (AbA) 金擔子素A（1 mg/ml）	1ml
MF2501-200T	Yeast Transformation Kit 酵母轉化試劑盒	200T

— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。

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