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      F-DH5a化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

      F-DH5a化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

      簡要描述:

      F-DH5a化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞:是大腸桿菌DH5a菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的快速轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞,無需42℃熱激,37℃孵育步驟,只需冰浴,10min內(nèi)能完成轉(zhuǎn)化、涂板步驟。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1~5&#215;108 cfu/μg DNA.

      產(chǎn)品時間:2024-03-20

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      F-DH5a Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

       

      產(chǎn)品標(biāo)簽:

      F-DH5a;F-*0;DH10B;JM109;EPI400;羧芐;卡那霉素;鏈霉素;

       

      產(chǎn)品訂購:

      貨號

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      價格(元)  

      MF2348-2000UL   

      F-DH5a Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 

      20×100μl     

      280

      MF2348-10000UL

      F-DH5a Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

      100×100μl

      1280

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      產(chǎn)品組分:

      組分編號     

      組分名稱

      貨號(規(guī)格)

      MF2348-2000UL    

      MF2348-10000UL   

      MF2348-A

      F-DH5a Competent Cell

      20×100μl

      100×100μl

      MF2348-B

      Control Vector puC19, 10pg/μl    

      10μl

      10μl

       

      菌株描述

      DH5a菌株基因型:F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi-1 gyrA96 relA1 phoA

       

      產(chǎn)品描述

      本品是大腸桿菌DH5a菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的快速轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞,無需42℃熱激,37℃孵育步驟,只需冰浴,10min內(nèi)能完成轉(zhuǎn)化、涂板步驟。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1~5×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。

       

      注意事項

      5)   產(chǎn)品包裝內(nèi)含質(zhì)粒pUC19 DNA(10pg/μl),供對照實驗用。

      6)   為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

       

      使用方法【所有操作均在無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)下進(jìn)行】

      一、  快速轉(zhuǎn)化操作(10min)

      1.1    提前15min將用到的篩選培養(yǎng)平板拿到37℃預(yù)熱。

      1.2    取F-DH5a感受態(tài)細(xì)胞從-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物),并用手彈打管底輕輕混勻,冰中靜置5min。

      1.3    用移液槍將感受態(tài)細(xì)胞-DNA混合物轉(zhuǎn)移到37℃預(yù)熱的LB篩選培養(yǎng)平板上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,表面無水漬。

      1.4    將平板倒置于37℃過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選,至少培養(yǎng)15h。

      【注意】:F-DH5a感受態(tài)細(xì)胞涂含氨芐或羧芐篩選培養(yǎng)平板時效率搞,若涂卡那霉素或其他抗生素平板,轉(zhuǎn)化效率會下降(由于沒有孵育步驟,卡那霉素等對菌體毒性較大)。若要提高卡那霉素或其他抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化效率,按照快速熱激轉(zhuǎn)化操作。

       

      二、  快速熱激轉(zhuǎn)化操作(25min,能提高轉(zhuǎn)化效率)

      【注意】:當(dāng)質(zhì)粒>7kb,通過以下熱激轉(zhuǎn)化操作:取F-DH5a感受態(tài)細(xì)胞從-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物),并用手管底輕輕混勻,冰中靜置20min。

      42℃水浴熱激45s,迅速放回冰上并靜置2min。加入700μl 無菌的LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃ 搖床,200 rpm振蕩培養(yǎng)30min。之后涂板。

       

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      MS0021-10G

      Chloramphenicol, USP Grade氯霉素

      10g

      MS0018-10G

      Ampicillin, Sodium Salt氨芐青霉素鈉

      10g

      MS0017-5G

      Carbenicillin, Disodium Salt羧芐青霉素二鈉鹽

      5g

      MS0019-10G

      Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素

      10g

      MS0014-1G

      Rifampicin, USP Grade利福平

      1g

       

       — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

       

      上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

       

      F-DH5a化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

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