單組分TMB顯色液 ELISA/ELISA-Spot分析

TMB One Solution (HRP-based ELISA, Super-sensitivity)

單組分TMB顯色液（ELISA，HRP顯色用，超靈敏度）

產品信息

【溫馨提示j】：見我司（懋康生物）整理的單組份TMB顯色液產品專題。

【溫馨提示k】：我司提供即用型的單組分TMB顯色液，產品性能非常穩定，且使用非常快捷，可以供應大貨。選購指南如下：

背景描述

酶聯免疫分析技術（ELISA）廣泛用于抗原、半抗原或抗體的定量或定性分析，辣根過氧化物酶（HRP）及其偶聯物是ELISA技術常用的一種酶，能催化底物如3,3'5,5'-四甲基聯苯胺（TMB）發生顯色反應，從而進行定量或定性分析。由于TMB比其他顯色底物具更高的靈敏度且無致癌性被廣泛使用，TMB主要用于ELISA，免疫斑點雜交或免疫組化等實驗，也有報道將其用于氯的檢測分析。

通常TMB顯色試劑由多個組分構成，必須在使用前進行配制，并且容易產生沉淀，使用相對不便且容易導致檢測結果不穩定。本品采用全新的TMB顯色技術，將所有相關試劑全部配在一個溶液，即僅由單一溶液組成，不僅簡化了操作步驟，而且使檢測結果更加穩定可靠。

本系列產品專門為ELISA實驗而設計。檢測原理在于HRP或其他適當過氧化物酶能催化生成可溶的藍色產物，此時通常可在370nm測定吸光度。當顯色反應被酸性溶液（如0.5-2M H2SO4，0.5M HCl，1M H3PO4）終止后，產物由藍色轉為黃色，此時可在450nm測定吸光度。

產品描述

我司提供三款ELISA專用的單組分TMB顯色液（HRP顯色用），分別是：標準級（貨號：MM2001）、高靈敏（MM2012）、超靈敏（MM2013），從反應速率和反應靈敏度上來比較，依次遞增~15%。其中，標準級（貨號：MM2001）顯色敏感度高，線性濃度范圍更寬，極其適合定量ELISA。超靈敏（MM2013）反應速率和反應靈敏度最高，極其適合定性ELISA。

本系列產品用于ELISA檢測，每個樣品通常使用0.1ml顯色液，則100ml本品約檢測1000個樣品，500ml本品約檢測5000個樣品。

保存與運輸方法

保存：2-8℃避光保存，2年有效。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1） 本品含TMB和H2O2，對人體有刺激性，請注意防護。

2） 如發現本品出現渾濁或顏色變為藍色，請停止使用。

3） 本系列產品（三款）在應用上各有千秋，無絕對的應用傾向，主要還是根據自身的實驗需求來選擇。

4） 本系列產品（三款）都可大量供貨，歡迎咨詢。

5） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法（ELISA，96孔板）

1） 使用之前，取出適量單組份TMB顯色液，使其回到室溫再開始使用；

2） 參考ELISA檢測試劑盒的實驗步驟，當與HRP標記抗體孵育一段時間后，用適當洗滌液洗滌3-5次，每次3-5min。

3） 洗滌完畢后，去除洗滌液，加入100μl單組份TMB顯色液。

4） 室溫避光孵育5-30min或更長時間（可長達24h），直至顯色到預期深淺。【注意】：建議根據實驗需求選擇試劑用量、顯色時間和反應溫度。

5） 直接在370nm測定吸光度。或者加入100μl 0.5-2M H2SO4 或商業化的TMB終止液（450nm）（貨號：MM2007）終止反應，隨后在450nm測定吸光度

常用問題

1.背景顯色太深

1）如果背景（沒有樣品的對照）顯色太深，一方面需考慮使用適當的封閉液進行封閉，如商業化封閉液或者和一抗相同來源的血清（10%）進行封閉。另一方面，使用經過適當吸附的二抗，以減小二抗的非特異性吸附。

2）可以考慮縮短顯色時間，或降低二抗濃度。另外，選擇適當強度的洗滌液，或延長洗滌時間也會有所幫助。

2.沒有顯色或顯色太弱

1）適當提高一抗或二抗的濃度。檢測二抗效果，滴一滴稀釋二抗在離心管內，檢測二抗是否被正常顯色。

2）可以考慮使用更加靈敏的放大檢測體系，例如生物su檢測體系。

3）可以適當延長顯色時間。

4）如果上述改進不能獲得預期效果，可以考慮更換效果更好的一抗或ELISA試劑盒。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。

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